葉綠素計是通過測量葉片在兩種波長范圍內(nèi)的透光系數(shù)來確定葉片當(dāng)前葉綠素的相對數(shù)量,也就是在葉綠素選擇吸收特定波長光的兩個波長區(qū)域,根據(jù)葉片透射光的量來計算測量值的。通過葉片透光程度快速的測量植物的葉綠素相對含量或“綠色程度”。植物葉片中的葉綠素含量反映了植物本身的光合能力和健康狀況,長勢良好的植物的葉子會含有更多的葉綠素。葉綠素的含量與葉片中氮的含量有很密切的關(guān)系,因而葉綠素測量值還能說明植物真實(shí)的硝基需求量,通過這種儀器有利于合理施加氮肥,提高氮的利用率,并可保護(hù)環(huán)境不會因?yàn)榈适褂眠^度而受到污染。
它的原理就是根據(jù)葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收,利用分光光度計在某一特定波長測定其吸光度,即可用公式計算出提取液中的各種色素的含量。某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位,液層厚度為1cm時,α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長下的吸光度而求得。如果溶液中含有數(shù)種吸收光物質(zhì),那么此混合液在某一波長下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長下吸光度的總和,這就是吸光度的加和性。如果想要測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量,那么就只需要測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A,并且根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在使用葉綠素計測定葉綠素a、b時,為了排除類胡蘿卜素的干擾,所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區(qū)的吸收峰。
本儀器用起來并不麻煩,因?yàn)樗w積較為小巧,所以,可以將其隨身攜帶到野外進(jìn)行活體檢測,即使是狹小的葉片,利用該儀器檢測起來也是毫不費(fèi)力的。檢測時要先校準(zhǔn),校準(zhǔn)完成后再進(jìn)行檢測,檢測時,要保證葉片覆蓋接收窗,不要測定過厚的樣品,比如說葉脈,如果測定的葉片葉脈較多,則需要多次檢測求平均值。要避免陽光直射,影響測量結(jié)果,保證發(fā)射窗和接收窗的干凈,關(guān)閉測量頭,按指壓臺直到聽到“嗶”聲,測量結(jié)果會顯示在屏幕上,并自動存儲。而且它的優(yōu)點(diǎn)也很多,其中一點(diǎn)就是可以實(shí)現(xiàn)作物活體檢測,這樣就可有效解決葉綠素降低問題,而且活體檢測不會影響到植物的正常生長,適合大范圍的測定工作。利用該儀器測定植物葉片中的葉綠素含量也是非常方便的,將儀器調(diào)零,之后將葉片放入測量頭部,關(guān)閉測量頭,按指壓臺聽到一聲向后,即可測試出葉綠素含量,葉綠素計測試的過程非常的簡單也非常的快。